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小鼠原代星形膠質細胞的特性及處理方法

更新時間:2022-01-21  |  點擊率:3048
  小鼠原代星形膠質細胞是膠質細胞中體積大的一種。用經典的金屬浸鍍技術(銀染色)顯示此類膠質細胞呈星形,從胞體發出許多長而分支的突起,伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經細胞的作用。
  纖維性星形膠質細胞多分布在腦脊髓的皮質,突起細長,分支較少,胞質中含,多分布在灰質,細胞突起粗短,分支多。胞質內膠質絲較少,又稱苔狀細胞。電鏡下星形膠質細胞的胞核有缺失,胞質較清亮,游離核糖核蛋白體和粗面內質網均很少,糖原顆粒豐富,有大量的膠質絲。纖維形星形膠質細胞的突起呈長圓柱形,而原漿性星形膠質細胞的突起呈薄片狀,并常包裹著神經細胞及其突觸。星形膠質細胞的腳板與血管內皮細胞之間相隔一層基板,腳板質膜與基板接觸處有半橋粒結構。
  小鼠原代星形膠質細胞的特性:
  1、組織來源于實驗動物的正常腦組織。
  2、細胞鑒定:神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法。
  3、經鑒定細胞純度高于90%。
  4、不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
  5、細胞生長方式:星狀細胞,貼壁培養。
  細胞處理:
  1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
  2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
  3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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